以下是?猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)說明書核心內(nèi)容整理，綜合多個高可信度來源：

　　一、實(shí)驗(yàn)原理?

　　采用?雙抗體夾心法?：

　　用純化的猴IFN-α抗體包被微孔板，依次加入樣本、HRP標(biāo)記的檢測抗體，形成復(fù)合物后通過TMB顯色，顏色深淺與IFN-α濃度正相關(guān)?。

　　二、試劑盒組成?

　　組件 規(guī)格/說明

　　預(yù)包被板 96孔板(12孔×8條)?

　　標(biāo)準(zhǔn)品 凍干粉(如480pg/ml)，需稀釋液重構(gòu)?

　　HRP標(biāo)記抗體 含檢測抗體、顯色劑A/B液、終止液?

　　濃縮洗滌液 30倍稀釋使用(需蒸餾水配制)?

　　輔助材料 封板膜、密封袋、說明書?

　　三、樣本處理?

　　血清/血漿?

　　室溫靜置后離心(2000-3000g，20分鐘)，避免溶血或脂血?。

　　長期保存需-20℃，?避免反復(fù)凍融??。

　　組織勻漿?

　　用PBS(含蛋白酶抑制劑)勻漿后離心取上清，建議稀釋后檢測?。

　　四、操作步驟?

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?

　　梯度稀釋(如480→240→120→60→30→15 pg/ml)，空白孔用稀釋液?。

　　加樣與孵育?

　　每孔加50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育30-60分鐘?。

　　洗滌?

　　手工洗板需拍干，重復(fù)5次;洗板機(jī)建議清洗5次?。

　　顯色與終止?

　　加TMB避光反應(yīng)15分鐘，終止后15分鐘內(nèi)測450nm OD值?。

　　五、注意事項(xiàng)?

　　環(huán)境控制?：顯色階段需避光，試劑使用前室溫平衡15-30分鐘?。

　　干擾物?：避免含NaN3的樣本(抑制HRP活性)?。

　　質(zhì)量控制?：建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣本做復(fù)孔，CV值應(yīng)<15%?。

　　六、技術(shù)參數(shù)?

　　項(xiàng)目 參數(shù)范圍

　　檢測范圍 6.25-1000pg/ml(不同品牌有差異)?

　　靈敏度 通常<15pg/ml?

　　有效期 未開封2-8℃保存6個月，開封板條需密封防潮?

　　如需完整說明書或操作視頻，建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取隨貨文件?。

　　注：以上資料僅供參考，不同品牌產(chǎn)品可能存在設(shè)計(jì)差異，操作前建議參考說明書?。