標(biāo)簽:ELISA試劑盒 天正信達(dá)試劑盒 生物試劑 酶標(biāo)板 吸頭 標(biāo)準(zhǔn)品
ELISA試劑盒常見問題及預(yù)防措施
一、ELISA操作流程技術(shù)要點
加樣細(xì)節(jié)?:
使用專用加樣器,避免氣泡產(chǎn)生,槍頭不可觸及孔壁?。
不同試劑更換吸頭,防止交叉污染?。
加樣量需準(zhǔn)確,避免孔間不一致。
孵育控制?:
嚴(yán)格按說明書溫度(通常37℃)和時間(如1小時)孵育,避免溫度波動?。
孵育期間確保酶標(biāo)板平放,避免液體溢出?。
洗滌性?:
洗滌液現(xiàn)用現(xiàn)配,每孔注滿洗滌液,浸泡時間一致(30-60秒)?。
甩板時快速翻轉(zhuǎn)120-150度,避免殘留液體污染相鄰孔?。
樣本處理?:
避免溶血和反復(fù)凍融,分裝后-20℃或-70℃保存。
混勻時輕柔顛倒,避免劇烈振蕩。
試劑保存?:
試劑盒4℃-8℃冷藏,避免冷凍;使用前室溫回溫40-60分鐘?。
標(biāo)準(zhǔn)品分裝后-20℃保存,嚴(yán)禁反復(fù)凍融?。
二、常見問題及預(yù)防措施
背景顏色深/非特異性染色?:
原因:洗滌不充分、試劑污染、顯色時間過長?。
措施:嚴(yán)格洗滌步驟,更換吸頭,控制顯色時間?。
所有孔均無明顯顏色?:
原因:試劑混淆、酶標(biāo)物失活、遺漏步驟?。
措施:核對試劑標(biāo)簽,檢查有效期,按流程操作?。
標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳?:
原因:標(biāo)準(zhǔn)品配制錯誤、儲存不當(dāng)、稀釋過早?。
措施:現(xiàn)配現(xiàn)用,避免室溫放置過久,按說明書稀釋?。
重復(fù)性差?:
原因:加樣不準(zhǔn)、孔間污染、儀器問題。
措施:校準(zhǔn)加樣器,避免交叉污染,定期維護(hù)儀器。
注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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