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ELISA實驗必看:規(guī)范品溶解與稀釋的操作步驟

更新時間:2025-08-13  |  點擊率:2327
  ELISA實驗必看:規(guī)范品溶解與稀釋的操作步驟
 
  以下是ELISA實驗中標(biāo)準品溶解與稀釋的規(guī)范操作步驟,綜合多個可靠來源整理而成:
 
  1. 標(biāo)準品準備‌
 
  平衡試劑‌:將標(biāo)準品和稀釋液取出后,室溫平衡30分鐘。
 
  核對試劑‌:按說明書確認標(biāo)準品濃度、稀釋液體積及所需孔位。
 
  2. 標(biāo)準品復(fù)溶與稀釋‌
 
  初次復(fù)溶‌:
 
  取1管凍干標(biāo)準品,加入500 μL標(biāo)準品稀釋液(或說明書指定體積)。
 
  靜置1–2分鐘,輕輕混勻后800g離心1分鐘,確保液體沉至管底。
 
  梯度稀釋‌:
 
  準備6–7支離心管(標(biāo)記S1–S7或濃度梯度),每管加入200 μL稀釋液。
 
  從S1管取150 μL至S2管混勻,依次倍比稀釋至S6管,S7管作為空白對照。
 
  注意:部分試劑盒要求最終稀釋液濃度需覆蓋檢測范圍(如0.15–10 ng/mL)。
 
  3. 加樣與孵育‌
 
  酶標(biāo)板操作‌:
 
  每孔加入50 μL稀釋后的標(biāo)準品(建議雙孔平行)。
 
  加入樣本或檢測抗體后,封板37℃孵育30–60分鐘。
 
  注意事項‌
 
  混勻方式‌:避免劇烈震蕩,推薦渦旋或移液槍吹打。
 
  時效性‌:顯色后需在15分鐘內(nèi)終止并讀取OD值。
 
  注:以上資料僅供參考,如需進一步了解產(chǎn)品詳情,可參考品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。
 
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