人氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)ELISA試劑盒說(shuō)明書

　　TZXD-1709  人氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述?

　　檢測(cè)原理?：采用雙抗體夾心法(ELISA)檢測(cè)樣本中Ox-LDL含量，通過(guò)HRP酶催化TMB顯色，顏色深淺與目標(biāo)物濃度正相關(guān)。

　　適用樣本?：人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等生物液體。

　　檢測(cè)范圍?：0.15–20 μg/mL(不同品牌可能略有差異)。

　　二、試劑盒組成?

　　組分 規(guī)格(96T) 保存條件

　　包被抗Ox-LDL抗體微孔板 12孔×8條 2–8℃干燥

　　Ox-LDL標(biāo)準(zhǔn)品 0.3 mL×6管(濃度梯度) -20℃長(zhǎng)期保存

　　HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體 10 mL×1瓶 避光2–8℃

　　TMB顯色液 A/B液各6 mL 避光2–8℃

　　終止液 6 mL×1瓶(2M H?SO?) 室溫

　　20×洗滌緩沖液 25 mL×1瓶(需稀釋) 2–8℃

　　(注：48T規(guī)格用量減半)

　　三、操作步驟?

　　樣本處理?

　　血清/血漿?：3000 rpm離心10分鐘，避免溶血或反復(fù)凍融。

　　組織勻漿?：按1:5–1:10比例加入PBS勻漿，離心取上清。

　　檢測(cè)流程?

　　步驟1?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(100 μL/孔)，37℃孵育1小時(shí)。

　　步驟2?：洗滌5次(每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干)。

　　步驟3?：加入HRP標(biāo)記抗體(50 μL/孔)，37℃孵育30分鐘。

　　步驟4?：再次洗滌，加入TMB顯色液(各50 μL/孔)，避光反應(yīng)15分鐘。

　　步驟5?：加入終止液(50 μL/孔)，立即用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm OD值。

　　結(jié)果計(jì)算?

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本中Ox-LDL濃度。

　　四、注意事項(xiàng)?

　　質(zhì)量控制?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%，標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.99。

　　保存條件?：未開封試劑盒2–8℃保存6個(gè)月;開封后標(biāo)準(zhǔn)品及抗體需-20℃保存。

　　干擾因素?：避免使用溶血、高脂血或污染樣本。

　　五、技術(shù)參數(shù)?

　　靈敏度?：0.04–0.078 μg/mL。

　　特異性?：不與天然LDL或其他脂蛋白交叉反應(yīng)。

　　臨床應(yīng)用?：動(dòng)脈粥樣硬化、心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

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