Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

HRbio™ Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit  逆轉(zhuǎn)錄是基于HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase開發(fā)的試劑盒。與HRbio™  M-MLV (H^-) Reverse Transcriptase相比，HRbio™  Ⅱ Reverse Transcriptase熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受高達(dá)50℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí)，該酶增強(qiáng)了與模板的親和力，適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。HRbio™  Ⅱ Reverse Transcriptase合成全長(zhǎng)cDNA的能力也有了提升，可擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)10 kb的cDNA。
     試劑盒中包含由總RNA或mRNA合成高鏈cDNA所需的所有成分，并提供兩種cDNA合成引物：Random Primers N6和oligo (dT)₁₈，合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可直接用來進(jìn)行后續(xù)PCR或者qPCR反應(yīng)。

產(chǎn)品組分

【注】：

1）5×HRbio™ Ⅱ Buffer中包含dNTP。

2）HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix中包含RNase inhibitor。

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。

注意事項(xiàng)

1）反應(yīng)液的配制應(yīng)在冰上操作完成，操作過程應(yīng)避免RNase污染；

2)  為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉(zhuǎn)錄

鏈cDNA合成操作步驟

1. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制（20 μL體系）

【可省略】：若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為PCR，針對(duì)復(fù)雜模板，可將RNA、H₂O、反轉(zhuǎn)錄引物在65℃孵育5 min 后，迅速冰上冷卻，然后再加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix；若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為qPCR，則可省略65℃孵育步驟，直接在體系中加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix。

【注】：若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為qPCR，建議Total RNA 或 mRNA投入量不超過1 μg或100 ng，如果目的基因的表達(dá)豐度非常低，最多可投入5 μg Total RNA或500 ng mRNA。

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