大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書

　　BS-8510 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒

　　有效期：6個(gè)月(4℃避光保存)

　　一、試劑盒組成

　　預(yù)包被酶標(biāo)板：96孔/48孔，包被抗大鼠FGFR1單抗。

　　標(biāo)準(zhǔn)品：6個(gè)濃度梯度(0-1000 pg/mL)，凍干粉需復(fù)溶。

　　生物素化檢測(cè)抗體：HRP標(biāo)記，30倍濃縮液(0.4 mL)。

　　顯色系統(tǒng)：TMB底物液(15 mL)、終止液(2M H?SO?，15 mL)。

　　輔助試劑：洗滌緩沖液(30×濃縮液)、樣本稀釋液(含1% BSA)。

　　二、實(shí)驗(yàn)流程

　　樣本準(zhǔn)備

　　血清/血漿：采集后3000×g離心10分鐘，避免溶血。

　　組織勻漿：按1:9(w/v)加入PBS勻漿，離心取上清。

　　細(xì)胞上清：直接檢測(cè)或離心去除碎片。

　　保存：短期4℃(≤48小時(shí))，長(zhǎng)期-80℃(避免反復(fù)凍融)。

　　檢測(cè)步驟

　　加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL/孔，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌：洗滌緩沖液(1:20稀釋)洗板3次，拍干。

　　加抗體：生物素化抗體100μL/孔，37℃孵育60分鐘。

　　顯色：TMB底物液100μL/孔，避光反應(yīng)15分鐘，終止液50μL/孔。

　　讀數(shù)：450nm波長(zhǎng)測(cè)OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。

　　三、注意事項(xiàng)

　　交叉反應(yīng)：本試劑盒特異性針對(duì)大鼠FGFR1，與人源FGFR1交叉反應(yīng)率<5%。

　　靈敏度：檢測(cè)下限為15 pg/mL，線性范圍50-1000 pg/mL。

　　干擾因素：避免高脂或溶血樣本，建議稀釋后復(fù)測(cè)。

　　質(zhì)量控制：每板需設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔，CV值應(yīng)<10%。

　　四、數(shù)據(jù)示例

　　標(biāo)準(zhǔn)品濃度 (pg/mL)OD450均值

　　00.05

　　500.32

　　1000.67

　　擬合曲線：建議采用四參數(shù)邏輯回歸(4PL)模型。

　　五、技術(shù)支持

　　問(wèn)題排查：若OD值異常，檢查洗滌步驟或底物避光性。

　　定制服務(wù)：可提供大鼠FGFR1重組蛋白(15kDa)作為陽(yáng)性對(duì)照

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒