ELISA實驗：酶聯(lián)免疫吸附測定原理

　　ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的高靈敏度免疫檢測技術(shù)，通過酶催化顯色反應(yīng)實現(xiàn)目標物質(zhì)的定性或定量分析?。其核心原理如下：

　　基本原理?

　　固相包被?

　　將抗原或抗體固定在聚苯乙烯微孔板等固相載體表面，保持其免疫活性?。

　　酶標記結(jié)合?

　　使用辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)標記抗體/抗原，形成酶標復(fù)合物，既保留免疫活性又具備酶催化能力?。

　　顯色反應(yīng)?

　　加入底物(如TMB或PNPP)后，酶催化底物生成有色產(chǎn)物，顏色深淺與目標物濃度成正比，通過酶標儀測定吸光度值定量?。

　　Elisa的檢測原理

　　ELISA的定義和基本原理

　　ELISA的三個核心步驟

　　夾心法實驗流程

　　ELISA的三種檢測類型

　　ELISA的總結(jié)

　　技術(shù)特點?

　　高靈敏度?：檢測限可達皮克級(pg/mL)?。

　　特異性強?：依賴抗原-抗體結(jié)合，單克隆抗體技術(shù)進一步提升了特異性?。

　　方法多樣?：包括雙抗體夾心法(大分子)、競爭法(小分子)、間接法(抗體檢測)等?。

　　應(yīng)用場景?

　　醫(yī)學(xué)診斷?：HIV、HBV等傳染病檢測，腫瘤標志物篩查?。

　　科研領(lǐng)域?：細胞因子定量、藥物藥效評價?。

　　食品安全?：獸藥殘留、過敏原檢測?。

　　關(guān)鍵注意事項?

　　加樣精度?：移液器需校準，避免氣泡或孔壁殘留導(dǎo)致誤差?。

　　溫度控制?：試劑與樣本需平衡至室溫，減少動力學(xué)差異?。

　　洗滌?：手工拍板需垂直操作，機器洗板需檢查沖洗頭通暢?。

　　如需進一步了解實驗流程，可參考：ELISA操作視頻演示?。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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