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ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),樣本處理的基本步驟

更新時(shí)間:2025-10-22  |  點(diǎn)擊率:645
  ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),樣本處理的基本步驟
 
  因樣本類(lèi)型而異,以下是常見(jiàn)樣本的標(biāo)準(zhǔn)操作流程及注意事項(xiàng):
 
  一、血清樣本
 
  采集與靜置‌:使用無(wú)抗凝劑試管采集血液,室溫靜置1小時(shí)或4℃過(guò)夜(傾斜放置可加速析出)‌。
 
  離心‌:4℃條件下1000×g離心15-20分鐘,收集上清液‌。
 
  保存‌:分裝后-20℃/-80℃保存,避免反復(fù)凍融‌。
 
  二、血漿樣本
 
  抗凝處理‌:使用EDTA、肝素鈉等抗凝劑采血管,采集后30分鐘內(nèi)完成離心‌。
 
  離心條件‌:4℃、1000×g離心15分鐘,避免溶血或高脂樣本‌。
 
  三、細(xì)胞培養(yǎng)上清
 
  直接1000×g離心20分鐘去除細(xì)胞碎片,上清液分裝凍存‌。
 
  四、細(xì)胞裂解液
 
  裂解方法‌:反復(fù)凍融或超聲破碎,加入蛋白酶抑制劑‌。
 
  離心‌:1500×g離心10分鐘去除碎片。
 
  五、組織勻漿
 
  預(yù)處理‌:冰浴中勻漿,按1:9(組織重量體積)比例處理‌。
 
  離心‌:5000×g離心5-10分鐘取上清。
 
  關(guān)鍵注意事項(xiàng)‌:
 
  避免溶血、細(xì)菌污染及反復(fù)凍融‌。
 
  特殊樣本需專(zhuān)業(yè)采集。
 
  不同樣本需根據(jù)試劑盒要求調(diào)整處理細(xì)節(jié)‌。
 
  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。
 
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