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Elisa實驗:ELISA測定中定性與定量分析

更新時間:2025-08-08  |  點擊率:458

  

  以下是ELISA測定中定性與定量分析的對比說明:

  一、核心區(qū)別?

  維度? ?定性分析? ?定量分析?

  檢測目標(biāo)? 判斷樣本中目標(biāo)物是否存在(陽性/陰性) 精確測定目標(biāo)物濃度(ng/mL或IU/mL)

  數(shù)據(jù)輸出? 通過OD值與臨界值(Cut-off)比較判斷結(jié)果 通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度值

  適用方法? 競爭法、直接法為主 雙抗夾心法為主(靈敏度更高)

  二、定性分析關(guān)鍵點?

  結(jié)果判讀?

  肉眼觀察顏色變化或通過酶標(biāo)儀讀取OD值,與預(yù)設(shè)閾值比較

  例如:HIV抗體篩查中OD值>Cut-off判為陽性

  臨界值設(shè)定?

  通常為陰性對照OD值的2.1倍(需結(jié)合試劑盒說明調(diào)整)

  三、定量分析技術(shù)要點?

  標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建?

  使用5-7個濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品(如0-1000 pg/mL)

  推薦4/5參數(shù)邏輯(4PL/5PL)曲線擬合(R2>0.99)

  濃度計算?

  將樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,乘以稀釋倍數(shù)

  示例:人IL-6檢測中,OD=1.2對應(yīng)曲線濃度250 pg/mL

  四、方法選擇建議?

  優(yōu)先定性?:快速篩查(如妊娠試紙、傳染病初篩)

  優(yōu)先定量?:科研數(shù)據(jù)(如細(xì)胞因子表達(dá)量)、臨床療效監(jiān)測

  注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。

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