天正信達(dá)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中洗滌注意事項(xiàng)

　　以下是天正信達(dá)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中洗滌操作的注意事項(xiàng)，綜合關(guān)鍵步驟與優(yōu)化建議：

　　一、洗滌液配置與選擇

　　緩沖液配制‌

　　使用pH 7.2-7.4的PBST(含0.05%-0.2% Tween-20)，避免濃度過高導(dǎo)致包被物解吸附。

　　若樣本含金屬離子干擾，可添加1-5mM EDTA增強(qiáng)洗滌效果。

　　溫度控制‌

　　洗液需預(yù)熱至20-30℃，低溫易導(dǎo)致“花板”現(xiàn)象(非特異性殘留)。

　　二、手工洗滌操作要點(diǎn)

　　浸泡式洗滌‌

　　每孔注滿200-300μL洗液，靜置1-2分鐘并間歇搖動(dòng)，重復(fù)3-4次。

　　拍干時(shí)垂直扣板，避免左右甩動(dòng)導(dǎo)致交叉污染。

　　流水沖洗式‌

　　適用于微量滴定板，水流沖擊孔表面2分鐘可提升洗滌效率。

　　三、洗板機(jī)使用規(guī)范

　　參數(shù)設(shè)置‌

　　洗滌量需略超包被體積(如350μL/孔)，吸液高度調(diào)至距孔底0.5-1mm以減少殘留。

　　推薦3次循環(huán)洗滌，過度洗滌可能降低信號(hào)強(qiáng)度。

　　維護(hù)檢查‌

　　每日校準(zhǔn)注液量，殘液量需≤2μL，及時(shí)更換堵塞吸頭。

　　四、常見問題處理

　　現(xiàn)象‌ ‌原因‌ ‌解決方案‌

　　高背景信號(hào)‌ 洗滌不或交叉污染 增加洗滌次數(shù)至5-6次，優(yōu)化拍干動(dòng)作

　　孔間差異大‌ 洗板機(jī)吸液不均 檢查吸頭是否堵塞，調(diào)整抽吸位置居中

　　板底殘留水漬‌ 拍干不或?yàn)V紙掉屑 使用無塵吸水紙，最后一次拍干加強(qiáng)力度

　　五、天正信達(dá)特別提示

　　封閉后洗滌‌：使用5% BSA封閉后，需PBST洗滌3次以去除非結(jié)合蛋白。

　　顯色前處理‌：最后一次洗滌后需拍干，避免殘留液體稀釋底物。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。

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