無(wú)血清細(xì)胞凍存液，科研界的新寵，如果跟傳統(tǒng)細(xì)胞保存方法對(duì)比?

　　無(wú)血清細(xì)胞凍存液是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中的一項(xiàng)創(chuàng)新，它摒棄了傳統(tǒng)凍存液中的血清成分，轉(zhuǎn)而采用其他營(yíng)養(yǎng)成分，如葡萄糖、氨基酸等，同時(shí)含有適量的DMSO作為保護(hù)劑。這種凍存液不僅適用于各種常見(jiàn)和腫瘤動(dòng)物細(xì)胞株，還能減少細(xì)菌、病毒和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)，提高細(xì)胞凍存的存活率和復(fù)蘇率。

　　使用無(wú)血清細(xì)胞凍存液，無(wú)需經(jīng)過(guò)繁瑣的程序降溫過(guò)程，細(xì)胞可直接置于-80℃冰箱中長(zhǎng)期保存，甚至可直接進(jìn)行微量、原位凍存，極大地節(jié)省了時(shí)間和精力。此外，由于不含血清及動(dòng)物源成分，各批次產(chǎn)品之間的質(zhì)量一致性更高，降低了細(xì)胞污染的可能性。

　　以下是關(guān)于無(wú)血清細(xì)胞凍存液的系統(tǒng)性總結(jié)：

　　一、核心特性

　　成分優(yōu)勢(shì)?

　　不含動(dòng)物源蛋白和血清，避免病毒/支原體污染風(fēng)險(xiǎn)，適用于臨床級(jí)細(xì)胞制劑制備?

　　明確化學(xué)成分(含DMSO、葡萄糖等)確保批次穩(wěn)定性，復(fù)蘇活率普遍>80%?

　　技術(shù)突破?

　　玻璃化凍存技術(shù)可替代傳統(tǒng)DMSO配方，實(shí)現(xiàn)-80℃直接凍存且無(wú)需程序降溫?

　　部分產(chǎn)品支持常溫儲(chǔ)運(yùn)(如CELLSAVING凍存液)，降低冷鏈成本?

　　二、適用場(chǎng)景

　　細(xì)胞治療領(lǐng)域?

　　CAR-T、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞凍存，符合IND申報(bào)要求?

　　干細(xì)胞(MSC)及原代細(xì)胞保存，減少異源成分干擾?

　　常規(guī)研究應(yīng)用?

　　腫瘤細(xì)胞系(Hela、A549等)及工程細(xì)胞(CHO、HEK293)長(zhǎng)期保存?

　　無(wú)血清培養(yǎng)體系銜接，避免血清引入的變量干擾?

　　三、操作要點(diǎn)

　　凍存流程?

　　1. 細(xì)胞消化后離心(1000rpm, 5min)棄上清?

　　2. 用預(yù)冷凍存液重懸(推薦密度5×10?-1×10? cells/mL)?

　　3. 分裝至凍存管，直接轉(zhuǎn)移至-80℃(玻璃化產(chǎn)品)或漸進(jìn)降溫?

　　復(fù)蘇注意事項(xiàng)?

　　37℃水浴快速解凍后需立即用5倍體積培養(yǎng)基稀釋?

　　對(duì)DMSO敏感細(xì)胞(如原代細(xì)胞)需預(yù)先測(cè)試凍存效果?

　　四、產(chǎn)品選擇指南

　　參數(shù) 推薦標(biāo)準(zhǔn) 代表產(chǎn)品

　　凍存溫度? -80℃直接保存(玻璃化技術(shù)優(yōu)先)? 玻璃化凍存液?

　　有效期? ≥24個(gè)月(4℃保存)? CELLSAVING?

　　認(rèn)證要求? 優(yōu)先選擇NMPA/FDA備案產(chǎn)品? OptiVitro系列?

　　(注：實(shí)驗(yàn)前需驗(yàn)證目標(biāo)細(xì)胞適配性，非常規(guī)細(xì)胞建議先試用小樣?)

　　目前，市場(chǎng)上已有多種無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品，如SERZNA、BUNSEN本生等，它們均得到了廣泛認(rèn)可和應(yīng)用，為細(xì)胞保存和研究提供了更多選擇。

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